تهیه محیط کشت هلیکوباکترپیلوری :

  • شروع کننده موضوع ABAN dokht
  • بازدیدها 232
  • پاسخ ها 0
  • تاریخ شروع

ABAN dokht

کاربر نگاه دانلود
کاربر نگاه دانلود
عضویت
2016/01/17
ارسالی ها
2,239
امتیاز واکنش
8,811
امتیاز
596
محل سکونت
البرز
تهیه محیط کشت هلیکوباکترپیلوری :


طرز تهیه بروسلا آگار غنی شده :
محیط کشت باکتری شامل بروسلا آگار غنی شده با خون دفیبرینه گوسفندی، سرم جنین گوساله و آنتی بیوتیک می باشد. برای تهیه این محیط به روش زیر عمل شد :
1-5/20 گرم بروسلا آگار در یک ارلن یک لیتری ریخته و مقدار 5/479 میلی لیتر آب مقطر (حجم نهایی محیط کشت 500 میلی لیتر) به آن اضافه گردید و محیط کشت تا شفاف شدن کامل جوشانده و سپس به مدت 15 دقیقه در دمای 121 اتوکلاو شد.
2-پس از سرد شدن محیط کشت (50-40 درجه) ،50 میلی لیتر خون دفیبرینه گوسفندی (با غلظت نهایی 10% ) و 35 میلی لیتر سرم جنین گوساله (با غلظت نهایی 7%) به محیط کشت اضافه شد .
3-پس از سرد شدن نسبی محیط کشت،آنتی بیوتیک های ذکر شده به محیط کشت اضافه و در پلیت های 6 سانتی متری تقسیم شد و سپس تا هنگام کشت باکتری در یخچال نگهداری گردید .
4-برای تهیه آنتی بیوتیک ها به روش زیر عمل شد :
برای تهیه محلول آنتی بیوتیک های ونکومایسین و پلی میکسین و تری متوپریم از ویال های آنتی بیوتیکی استفاده گردید. به هر ویال ساپلیمنت آنتی بیوتیکی 2 میلی لیتر آب مقطر استریل افزوده می گردید و به این صورت 5 میلی لیتر از محلول ساپلمنت آنتی بیوتیکی به حجم 500 میلی لیتر محیط کشت اضافه می شد و سپس داخل پلیت ها تقسیم می شد و یک شبانه روز در انکوباتور 37 درجه یا دمای اتاق نگه داشته می شد، بعد از اطمینان از عدم آلودگی داخل یخچال نگه داشته می شد .
 
بالا